-01-引言

2022年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)的揭幕，將“點(diǎn)擊化學(xué)”這一前沿技術(shù)推向公眾視野。三位科學(xué)家的突破性工作，不僅革新了有機(jī)合成領(lǐng)域，更為癌癥治療開(kāi)辟了新路徑——抗體偶聯(lián)藥物（Antibody-Drug Conjugate, ADC）的研發(fā)因點(diǎn)擊化學(xué)的賦能，正邁向更高精度與更低毒性的新紀(jì)元。

-02-什么是點(diǎn)擊化學(xué)？

點(diǎn)擊化學(xué)是一種高效、精準(zhǔn)的分子合成技術(shù)，其核心思想是通過(guò)快速、高選擇性的化學(xué)反應(yīng)，像“拼樂(lè)高”一樣將分子模塊連接起來(lái)。該技術(shù)由諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)得主Barry Sharpless于2001年提出，具有以下核心特點(diǎn)：

1. 高效性：反應(yīng)在溫和條件下即可快速完成，產(chǎn)率高達(dá)90%以上，副產(chǎn)物極少。

2. 模塊化：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化反應(yīng)基團(tuán)（如疊氮化物和炔烴），實(shí)現(xiàn)不同分子模塊的靈活拼接。

3. 生物正交性：反應(yīng)在活體環(huán)境中（如細(xì)胞、血液）也能安全進(jìn)行，幾乎不干擾正常生理過(guò)程。

-03-點(diǎn)擊化學(xué)賦能ADC的三大核心優(yōu)勢(shì)

1.精準(zhǔn)靶向：告別“隨機(jī)偶聯(lián)”時(shí)代

早期ADC通過(guò)抗體自身賴氨酸或半胱氨酸隨機(jī)偶聯(lián)藥物，導(dǎo)致藥物-抗體比（DAR）不均，療效波動(dòng)明顯。點(diǎn)擊化學(xué)在抗體和藥物上分別引入特定官能團(tuán)（如疊氮化物與炔烴），實(shí)現(xiàn)“一對(duì)一”精準(zhǔn)連接，DAR值可控性達(dá)96%以上。

2.超強(qiáng)穩(wěn)定性：分子級(jí)的“鉚釘技術(shù)”

點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)（如CuAAC、SPAAC）形成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)（如三唑環(huán)）具有化學(xué)惰性，抗酸抗酶能力顯著提升。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，基于SPAAC技術(shù)構(gòu)建的ADC在血清中穩(wěn)定存放3天仍保持95%以上完整性，遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)硫醚鍵。

3.多元化應(yīng)用場(chǎng)景：“模塊化”藥物設(shè)計(jì)

通過(guò)“點(diǎn)擊-釋放”策略定向激活藥物，例如M1231雙抗ADC使用IEDDA反應(yīng)，將毒性載荷僅釋放于HER2/HER3共表達(dá)腫瘤。雙載荷ADC利用分支連接子搭載不同機(jī)制藥物（如微管抑制劑+DNA損傷劑），通過(guò)一次點(diǎn)擊反應(yīng)實(shí)現(xiàn)雙重抗腫瘤打擊。

-04-點(diǎn)擊化學(xué)在ADC合成中的實(shí)際應(yīng)用

點(diǎn)擊化學(xué)在ADCs合成中的應(yīng)用主要包括以下反應(yīng)：

銅催化疊氮-炔烴環(huán)加成（CuAAC）

CuAAC是點(diǎn)擊化學(xué)的核心反應(yīng)，該反應(yīng)利用Cu(I)催化疊氮與炔烴生成1,4-二取代三唑鍵，具有高產(chǎn)率、高選擇性和溫和條件等優(yōu)勢(shì)。在ADCs中，CuAAC常用于抗體與連接子（linker）或細(xì)胞毒素的偶聯(lián)，例如通過(guò)疊氮化抗體與炔基化藥物分子的結(jié)合。但銅離子的細(xì)胞毒性限制了其在活體系統(tǒng)中的應(yīng)用。

應(yīng)變促進(jìn)疊氮-炔烴環(huán)加成（SPAAC）

SPAAC通過(guò)環(huán)辛炔的環(huán)張力降低活化能，無(wú)需金屬催化劑即可高效反應(yīng)，解決了CuAAC的生物相容性問(wèn)題。已有研究通過(guò)SPAAC將LILRB4抗體與MMAF偶聯(lián)，成功構(gòu)建靶向白血病的高DAR（藥物-抗體比）ADC，表現(xiàn)出靶向選擇性和良好藥效。

肟鍵形成（Oxime Ligation）

利用醛/酮與氨基氧基的縮合反應(yīng)，偶聯(lián)位點(diǎn)可控。例如，研究表明通過(guò)抗體的醛基修飾與氨基氧官能化的藥物結(jié)合，可以形成肟鍵連接。盡管早期肟鍵因酸堿敏感性應(yīng)用受限，但優(yōu)化后的體系已顯示出血清穩(wěn)定性提升。

例

邁克爾加成（Michael Addition）

邁克爾加成反應(yīng)是ADC合成中最核心的化學(xué)偶聯(lián)策略之一，尤其在基于半胱氨酸的隨機(jī)偶聯(lián)技術(shù)中占據(jù)主導(dǎo)地位。該反應(yīng)通過(guò)α,β-不飽和羰基化合物（如馬來(lái)酰亞胺）與巰基的共軛加成，實(shí)現(xiàn)抗體與細(xì)胞毒素的高效偶聯(lián)。

酰肼-異吡咯烷-斯佩格勒連接（HIPS）

通過(guò)醛基與酰肼的縮合生成穩(wěn)定的C-C鍵。例如，使用甲酰甘氨酸生成酶在抗體引入醛基，隨后與含有異吡咯烷的載藥接頭反應(yīng)，生成特異性ADC。實(shí)驗(yàn)顯示該連接方式的HIPS-ADC體外活性與已獲批ADC相當(dāng)，并在動(dòng)物模型中抑制腫瘤生長(zhǎng)。

狄爾斯-阿爾德反應(yīng)（Diels-Alder, DA）

正向DA反應(yīng)：通過(guò)雙烯體（如環(huán)戊二烯）與親雙烯體（如馬來(lái)酰亞胺）的環(huán)加成，實(shí)現(xiàn)溫和條件下的穩(wěn)定偶聯(lián)。研究證明該反應(yīng)制備的ADC在血清中穩(wěn)定性優(yōu)于傳統(tǒng)硫醇-馬來(lái)酰亞胺連接。

逆向電子需求DA（IEDDA）：采用四嗪與環(huán)辛烯類化合物快速反應(yīng)（速率達(dá)10–10Ms），適用于活體環(huán)境。例如，抗體搭載環(huán)辛烯后通過(guò)IEDDA與四嗪修飾的載藥MMAE連接，顯著提升偶聯(lián)效率及靶向性。

-05-突破與挑戰(zhàn)：點(diǎn)擊化學(xué)的未竟之路

1.體內(nèi)反應(yīng)效率的優(yōu)化盡管體外實(shí)驗(yàn)顯示點(diǎn)擊反應(yīng)高效，但活體環(huán)境中的復(fù)雜因素（如血流量、滲透壓）可能降低偶聯(lián)效率。解決方案包括開(kāi)發(fā)更活潑的環(huán)辛炔衍生物（如DIBAC）。

2.連接子穩(wěn)定性的平衡過(guò)度穩(wěn)定的連接子可能導(dǎo)致藥物無(wú)法釋放，而過(guò)于活躍的連接子易在血液中分解。新型“雙響應(yīng)”連接子（如同時(shí)響應(yīng)pH和酶）正在臨床試驗(yàn)中驗(yàn)證。

3.規(guī)模化生產(chǎn)的成本控制無(wú)銅點(diǎn)擊試劑（如DBCO）價(jià)格高昂，限制工業(yè)化應(yīng)用。合成生物學(xué)技術(shù)的進(jìn)步（如微生物發(fā)酵生產(chǎn)環(huán)辛炔）有望降低成本。

-06-結(jié)語(yǔ)

從實(shí)驗(yàn)室到臨床，點(diǎn)擊化學(xué)正推動(dòng)ADC從“粗放型”向“精準(zhǔn)型”跨越。目前，全球已有超過(guò)20款點(diǎn)擊化學(xué)衍生ADC進(jìn)入臨床，涵蓋乳腺癌、淋巴瘤、實(shí)體瘤等適應(yīng)癥。未來(lái)，隨著生物正交工具的迭代與跨學(xué)科合作（如AI輔助連接子設(shè)計(jì)），點(diǎn)擊化學(xué)有望徹底改寫癌癥治療格局，為患者帶來(lái)更高生存質(zhì)量與更長(zhǎng)生存期。

參考文獻(xiàn)：

1.Click chemistry in the synthesis of antibody-drug conjugates. Bioorg Chem.2024 Feb:143:106982.

       原文標(biāo)題 : 點(diǎn)擊化學(xué)：開(kāi)啟ADC的“黃金時(shí)代”