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文章背景簡(jiǎn)介

BACKGROUND INTRODUCTION

炎癥性腸�。╥nflammatory bowel disease，IBD）是一類發(fā)病機(jī)制尚不明確的腸道炎癥性疾病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）和克羅恩�。–rohn’s disease，CD）。潰瘍性結(jié)腸炎（UC）主要是一種連續(xù)的、慢性的炎癥反應(yīng)，會(huì)從直腸一直延伸到結(jié)腸；而克羅恩�。–D）則是一種整個(gè)胃腸道（從口腔到肛門）都可能出現(xiàn)斑片狀、不連續(xù)的炎癥。這兩種腸道疾病都并不是致命的，但是卻帶來腹痛、腹瀉、便血、營(yíng)養(yǎng)障礙等痛楚，嚴(yán)重影響正常生活。對(duì)近50年來 IBD的 流行病學(xué)文獻(xiàn)分析顯示：目前，IBD在歐洲的發(fā)病率最高，但是許多發(fā)展中國(guó)家因生活方式日漸西化，其發(fā)病率也在逐漸增加。

對(duì)于IBD， 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的主要藥物治療包括氨基糖苷類抗生素、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、單克隆抗體類等，但這些藥物的作用都比較局限、副作用較大。因此，尋找新的IBD治療方法，依然十分重要。

益生菌對(duì)腸道穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)作用，使其有望為腸炎性腸病的防治開辟新的市場(chǎng)。乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）是一種非致病性、非侵入性的食品級(jí)微生物，已被廣泛應(yīng)用于食品發(fā)酵工業(yè)，被普遍認(rèn)為是一種安全的益生菌。同時(shí)，目前人們已經(jīng)可以通過簡(jiǎn)單的操作即可通過L． lactis將治療性蛋白生產(chǎn)、遞送到宿主的腸粘膜系統(tǒng)中去。然而，關(guān)于L． lactis的抗炎機(jī)制，目前還并不太清楚。

基于上述背景，本研究室通過建立潰瘍性結(jié)腸炎模型研究，圍繞我們前期篩選的益生菌新菌株L． lactis ML2108對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的防止作用機(jī)制展開了研究，該研究結(jié)果已于近期發(fā)表在國(guó)際知名期刊《Food ＆ Function》（IF＝3．27；農(nóng)林科學(xué)1區(qū)、食品科技2區(qū)）上。（Meiling Liu， Xiuxia Zhang， Yunpeng Hao，  et al． Protective effects of a novel probiotics Lactococcus lactis ML2018 in colitis： in vivo and in vitro evidence． Food Funct． 2019， 10： 1132－1145． doi： 10．1039／c8fo02301h． ）。

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所用到的主要方法

METHODS

1．     ELISA

2．     HE染色

3．     免疫組化

4．     western blot

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文章主要內(nèi)容摘要

ABSTRACT

腸道菌群失調(diào)及異常免疫反應(yīng)與炎癥性腸病（IBD）的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)。益生菌已被確定可以用于治療和預(yù)防IBD。本研究的目的是篩選一株具有抗炎活性的益生菌，并探討其潛在的作用機(jī)制。

對(duì)實(shí)驗(yàn)室前期保藏的58株乳酸菌進(jìn)行耐酸、耐膽鹽和細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)分析，以獲得具有良好體內(nèi)存活定植能力的菌株。確定其中4株菌具有較好的酸和膽鹽耐受性和細(xì)胞黏附能力。進(jìn)一步用這4株菌的發(fā)酵液上清和裂解液上清處理RAW264．7巨噬細(xì)胞，檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞存活的影響，同時(shí)評(píng)價(jià)其對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)一氧化氮（NO）釋放的抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)L． lactis ML2018具有較強(qiáng)的抑制LPS誘導(dǎo)釋放NO的能力。并且，L． lactis ML2018還顯著抑制了炎癥因子（TNF－1α，IL－6，IL－1β，IL－10、iNOS）的產(chǎn)生。

進(jìn)一步對(duì)ML2018的體內(nèi)抗炎作用進(jìn)行研究。實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建硫酸葡聚糖鈉（DSS）誘導(dǎo)的結(jié)腸炎動(dòng)物模型，發(fā)現(xiàn)灌胃給予L． lactis ML2018可明顯改善DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎。L． lactis ML2018可以預(yù)防體重下降、結(jié)腸長(zhǎng)度縮短及上皮細(xì)胞凋亡等病理現(xiàn)象；抑制DSS誘導(dǎo)的腸道炎癥反應(yīng)、減少促炎因子的過度分泌；抑制巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，控制纖維化；改善腸上皮屏障的完整性；上調(diào)腸道內(nèi)短鏈脂肪酸（SCFAs）的濃度。此外，L． lactis ML2018可以通過抑制NF－κB和MAPK信號(hào)通路的過度激活防止炎癥的發(fā)生，這些數(shù)據(jù)表明：L． lactis ML2018具有緩解和治療潰瘍性結(jié)腸炎的潛力，有望作為一種優(yōu)良的益生菌新菌株進(jìn)一步研究開發(fā)。

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