文章背景簡介   

肝細(xì)胞癌（HCC）是全球第六大常見癌癥，也是導(dǎo)致男性癌癥死亡的第二大原因。肝癌的進(jìn)展主要表現(xiàn)為細(xì)胞分化異常、浸潤生長快、轉(zhuǎn)移早、惡性程度高、預(yù)后差等。代謝異常（包括脂質(zhì)代謝異常），是癌細(xì)胞的一個重要特征。癌細(xì)胞中需要大量的脂肪酸來適應(yīng)癌細(xì)胞的高增殖率，癌細(xì)胞可以通過脂肪生成和脂質(zhì)分解途徑來獲得脂肪酸。

目前認(rèn)為甘油三酯脂肪酶（ATGL）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）和單酰甘油脂肪酶（MAGL）是參與脂肪分解的主要酶。ATGL通過將三酰甘油（TAG）水解為二酰甘油（DAG）和FFA，啟動TAG的代謝過程；之后HSL將DAG分解成單酰甘油（MAG）；最后MAG被MAGL進(jìn)一步分解為FFA和甘油。Daniel等人發(fā)現(xiàn)脂溶酶MAGL通過MAGL-FFA途徑促進(jìn)遷移、存活和體內(nèi)腫瘤生長。但也有其他研究顯示MAGL具有抑制腫瘤的作用，表明脂溶酶在腫瘤進(jìn)展中的作用還有待進(jìn)一步研究。最近有研究發(fā)現(xiàn)通過RNAi或小分子抑制劑抑制ATGL可以抑制腫瘤細(xì)胞的生長和運動（結(jié)腸腫瘤細(xì)胞和非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞），然而其對肝癌細(xì)胞的影響仍不清楚。

長鏈非編碼RNA NEAT1在包括肝癌的各種類型的癌癥中均有上調(diào)，有報道稱其與癌癥患者預(yù)后不良有關(guān)。現(xiàn)已證明NEAT1可通過與常見的microRNA結(jié)合來發(fā)揮競爭性內(nèi)源RNA的功能，但NEAT1影響腫瘤進(jìn)展的分子機制依然還需進(jìn)一步研究。

2018年，哈爾濱醫(yī)科大學(xué)的Liu X等人，在《Molecular Cancer》雜志（IF2018=7.776，醫(yī)學(xué)1區(qū)）發(fā)表了題為“Long non-coding RNA NEAT1-modulated abnormal lipolysis via ATGL drives hepatocellular carcinoma proliferation”的文章，對lncRNA-NEAT1介導(dǎo)的異常脂肪分解及其對肝癌細(xì)胞生長的影響展開了系列研究。

所用到的主要方法

1.慢病毒感染

2.瞬時轉(zhuǎn)染

3.CCK-8

4.Western Blot

5.免疫組化

6.Real time-PCR

7.FISH（fluorescence in situ hybridization）：是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是：如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。

8.熒光素酶報告實驗

9.統(tǒng)計學(xué)分析

文章主要內(nèi)容

代謝異常，包括脂質(zhì)代謝異常，是癌細(xì)胞的一個特征。已有研究表明，脂肪生成途徑可能促進(jìn)肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)生發(fā)展。然而，肝癌細(xì)胞中脂肪分解途徑的作用尚未闡明。本文通過RT-PCR、Western Blot和免疫組化等技術(shù)，比較了人肝癌組織和正常肝組織中脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）的水平以及NEAT1-ATGL介導(dǎo)的肝癌細(xì)胞和肝癌組織中二�；�甘油（DAG）和游離脂肪酸（FFA）水平。文章還通過體外和原位異種移植肝癌小鼠模型中評估了ATGL、DAG、FFA和NEAT1對肝癌細(xì)胞增殖的影響。此外還通過熒光素酶報告基因?qū)嶒炦M(jìn)一步分析了NEAT1/ATGL與miR-124-3p之間的相互作用。

結(jié)果顯示：肝細(xì)胞癌組織中甘油三酯脂肪酶（ATGL）呈現(xiàn)出顯著的高表達(dá)，且肝細(xì)胞癌組織中存在高水平的DAG和FFA。lncRNA-NEAT1可以調(diào)節(jié)ATGL的表達(dá)，并通過ATGL破壞肝癌細(xì)胞的脂肪分解；ATGL及其產(chǎn)物DAG和FFA與NEAT1介導(dǎo)的肝癌細(xì)胞生長有關(guān)；NEAT1通過結(jié)合miR-124-3p調(diào)控ATGL表達(dá)。此外，敲除NEAT1可通過miR-124-3-p/ATGL/DAG+FFA/PPARα等信號通路減弱肝癌細(xì)胞的生長。綜上所述，NEAT1通過ATGL調(diào)節(jié)異常脂肪代謝，從而促進(jìn)肝癌細(xì)胞的增殖。

Oct4調(diào)節(jié)長非編碼RNA（NEAT1、MALAT1）轉(zhuǎn)錄表達(dá)并促進(jìn)肺癌增殖遷移